转自：生物谷
慢性肝病是环球健康的一大要挟，很多身分如病毒感染、化学物资暴露和肠说念菌群失衡王人可能激勉。其中，慢性肝挫伤（CLD）尤其值得温存，因为它可能缓缓发展成肝硬化致使肝癌，而炎症在这个经过中起着要道作用。当今，咱们要紧需要更灵验的诊疗智商来交接这一挑战。
在寻找诊疗智商的经过中，骨髓间充质干细胞（BMSCs）因其组织开采和免疫转机才调而备受防备。可是，径直移植BMSCs存在细胞摒除、存活率低和潜在肿瘤变成等风险，这扬弃了其临床利用。
比年来的连络发现，BMSCs阐明诊疗作用主要通过旁分泌机制，其中BMSC养殖的细胞外囊泡（BMSC-EVs）尤为要道。这些纳米级的膜囊泡含有核酸、卵白质和脂质等，是细胞间通信的要紧介质，在转机巨噬细胞极化和放松炎症方面发达出后劲，但抗炎着力还不够设想。
槲皮素（Que）是一种庸碌存在于植物中的黄酮类化合物，具有抗炎、抗病毒、抗缺血和抗癌等多种药理活性。近日，王人门医科大学连络团队在Int Immunopharmacol发表了题为Quercetin-primed BMSC-derived extracellular vesicles ameliorate chronic liver damage through miR-136-5p and GNAS/STAT3 signaling pathways的连络论文，发现用槲皮素预处治BMSCs，可能增强BMSC-EVs的抗炎着力，从而更好地诊疗慢性肝病。
张开剩余76%在施行中，连络东说念主员从BALB/C小鼠的骨髓平分离培养出BMSCs，并对其进行缔结。然后，用不同浓度的槲皮素处治BMSCs，通过CCK-8施行笃定了能指令BMSCs分泌Que-EVs的恰当浓度（0.5 μM，48 h）。接着，他们从BMSCs的上清液中索取EVs，并通过透射电子显微镜、纳米颗粒追踪分析和卵白免疫思路等智商进行缔结，发现EVs和Que-EVs具有一样的大小和样式，直径约为60 nm，且抒发经典的名义标志物。
为了商量EVs和Que-EVs在体内的漫衍，连络东说念主员用荧光染料DIR标记它们，然后静脉打针到小鼠体内，6小时后发现它们主要在肝脏积贮。在体外施行中，将DIR标记的EVs和Que-EVs与RAW264.7细胞共孵育12小时，不雅察到细胞内有蛮横的荧光信号，ag真人百家乐 229622点co标明RAW264.7细胞给与了这些囊泡。
图1. BMSC、EV和Que-EV表征
在炎症联系连络中，连络东说念主员用脂多糖（LPS）处治RAW264.7细胞来模拟炎症环境。LPS权贵镌汰了RAW264.7细胞的活力并指令炎症反馈，但EVs和Que-EVs能阻拦炎症，镌汰炎症因子的mRNA抒发，增多抗炎因子的抒发，且Que-EVs的着力更为彰着。巨噬细胞在炎症转机中起着要紧作用，分为促炎的M1型和抗炎的M2型。施行发现，EVs和Que-EVs能阻拦M1型巨噬细胞极化，促进M2型巨噬细胞极化，从而放松炎症，Que-EVs的作用更强。
图2. Que-EVs促进LPS处治的RAW264.7细胞的M2极化并阻拦炎症
进一步的机制连络发现，EVs和Que-EVs通过转机GNAS/PI3K/ERK/STAT3信号通路联系卵白和基因的抒发来放松炎症，Que-EVs对该通路的阻拦作用更权贵。同期，连络东说念主员还发现miR-136-5p在慢性肝挫伤中抒发下调，而在Que-EVs中的抒发高于平素EVs。miR-136-5p通过靶向阻拦GNAS，阻拦LPS指令的RAW264.7细胞炎症和M1型巨噬细胞极化，阐明抗炎作用。
图3. Mir-136-5p在慢性肝挫伤中下调
在动物施行中，连络东说念主员通过给小鼠打针四氯化碳（CCl₄）确立了CLD模子，然后将小鼠分为模子组、EV组和Que-EV组，折柳赐与相应处治。收尾高慢，EVs和Que-EVs能改善CLD小鼠的肝脏炎症、纤维化进度，镌汰血清谷丙转氨酶（ALT）和谷草转氨酶（AST）水平，改善肝脏功能，转机巨噬细胞极化，阻拦GNAS/PI3K/ERK/STAT3通路联系卵白和基因的抒发，且Que-EVs的诊疗着力优于平素EVs。
要而言之，本连络标明Que-EVs通过miR-136-5p阻拦GNAS/PI3K/ERK/STAT3信号通路，转机巨噬细胞极化，从而放松炎症和慢性肝挫伤。这意味着用槲皮素预处治BMSCs来赢得EVs可能是优化CLD诊疗的灵验计谋，为未来基于EVs的慢性肝病诊疗提供了新的念念路和场所。不外，连络东说念主员也指出，未来还需要进一步连络Que-EVs是否能通过转机NLRP3炎性小体阐明更庸碌的抗炎作用，以更深化地了解其抗炎机制。
参考文件：
Jiang X, Liu Z, You H, et al. Quercetin-primed BMSC-derived extracellular vesicles ameliorate chronic liver damage through miR-136-5p and GNAS/STAT3 signaling pathways. Int Immunopharmacol. 2024;142(Pt B):113162. doi:10.1016/j.intimp.2024.113162
（转自：生物谷）Ag百家乐
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